Berhemanîn û taybetmendiya biyokîmyayî ya laccase NRC 620 ya kivarka îstirîdeyê û nirxandina bandora wê di zelalkirina ava sêvan de.

Piştî 25 rojan înkubasyona statîk li 28°C, lakaza ji *Pleurotus ostreatus* NRC620 çalakiya herî bilind di navgîna çandina fungî de nîşan da. Nirxên pH û germahiyê yên çêtirîn ji bo vê enzîmê bi rêzê ve 3.0 û 70°C bûn. Piştî 2 saetan înkubasyonê li 40°C û 50°C, çalakiya enzîmê bi rêzê ve 68.33% û 59.61% parast. Piştî 2 saetan înkubasyonê di tampona sîtrat-fosfatê de (pH 7.0), çalakiya enzîmê li %100 ma. Zêdekirina 10 mM MgSO₄ û CuSO₄ çalakiya enzîmê bi rêzê ve bi qasî %21 û %35 zêde kir, di heman demê de NaCl, MnCl₂, KCl, û CaCl₂ çalakiya enzîmê asteng kirin. Bi karanîna ABTS wekî substrat, parametreyên kînetîk (Km û Vmax) yên lakaza *Pleurotus ostreatus* NRC 620 bi rêzê ve 1.99 mM û 16,217 μmol min−1 L−1 bûn. Dermankirina enzîmatîk a nimûneyên ava sêvan hem pH û hem jî vîskozîtî bi girîngî kêm kir, û ev kêmkirin bi zêdebûna dema hilanînê re têkildar bû. Dermankirina lakazê bû sedema kêmbûnek sivik di naveroka tevahî ya fenolîk a ava sêvan de, lê kêmbûnek di çalakiya antîoksîdan de nehat dîtin.
Di salên dawî de, lêkolîneran bal kişandine ser sepandina biyoteknolojiya kesk di pîşesaziya xwarinê de. Lakaz yek ji enzîmên herî bikêrhatî di pîşesaziya xwarinê de ye, ku di warên wekî hilberandina ava fêkiyan, pijandin, stabîlîzasyona şerabê û baştirkirina taybetmendiyên organoleptîk ên hilberên xwarinê de serlêdan dibîne.¹Gelek riwekên bilind û mîkroorganîzma lakazê vedişêrin,²û fungên wekî deuteromycetes, ascomycetes, û basidiomycetes jî dikarin laccase hilberînin.³Lakaz (EC 1.10.3.2) oksîdazeke şîn e ku oksîjena molekulî bi karanîna sîstemek ji sê atomên sifir ên cuda vediguherîne avê, bi vî awayî cûrbecûr pêkhateyên fenolîk û amînên aromatîk oksîde dike. Di dema hilberîna ava fêkî û sebzeyan de, qehweyîbûna enzîmatîk û neenzîmatîk pirsgirêkên girîng in.⁴Ji ber ku ev made bandorek neyînî li ser reng, tam û bîhna ava fêkiyan dikin, divê ew werin rakirin.⁵
Ji hemû fêkiyan, sêv li cîhanê û li Yekîtiya Ewropayê herî zêde tê xwarin. Di sala 2019an de, hilberîna sêvan li cîhanê di rêza sêyemîn de bû, ku ji 87 milyon tonî derbas bû.⁶Sêv gelek pêkhateyên fenolîk dihewînin, di nav wan de flavonoîd û asîdên fenolîk ên wekî asîda kafeîk û asîda klorojenîk hene.⁷Ji ber ku ava sêvan bi gelemperî di forma xwe ya zelal de tê vexwarin, di dema pêvajoya parzûnkirinê de nêzîkî %50 heta %90ê pêkhateyên fenolîk winda dibin.⁸Îro, xerîdar bi gelemperî hilberên ku kêm hatine pêvajokirin hildibijêrin, wek ava sêvê ya ewrî ya bi rêjeya polîfenolê ya bilind. Lêbelê, ji ber rêjeya wê ya fenolîk a bilind, ev celeb ava sêvê bi taybetî ji bo guherîna reng û tarîbûnê hesas e.⁹Ji bo kêmkirin an jî pêşîgirtina tarîbûna ava sêvan, gelek teknolojî têne bikar anîn, di nav de rêbazên dermankirina germê yên wekî pasterîzasyon di 60–90°C de.¹⁰Lêbelê, li gorî lêkolîna Sauceda-Gálvez¹¹, pêvajoya germî dikare kîmyewiyên firardar tune bike û bandorê li taybetmendiyên organoleptîk ên ava sêvan bike. Alternatîfên rêbazên pêvajoya germî karbondîoksîta superkrîtîk, tîrêjên ultraviyole, ultrason, zexta hîdrostatîk a bilind, an homogenîzasyona zexta bilind in.¹²Karîgeriya van teknolojiyan û berhema ava fêkiyan a guncaw bi parametreyên ku têne bikar anîn û taybetmendiyên hilberê ve girêdayî ye. Bikaranîna wan a berfireh ji ber lêçûnên zêde, bandorên neyînî li ser kalîteya hin hilberên xwarinê, an jî neçalakkirina enzîman a nebaş sînordar e.^13,14
Lakaz dikare ji bo stabîlkirin û zelalkirina ava fêkiyan were bikar anîn.¹⁵Gökmen û yên din¹⁶Ji bo zelalkirina ava fêkiyan bikaranîna lakazê pêşniyar dikin ji ber ku ew bi bandor pêkhateyên fenolîk ji holê radike bi veguherandina wan bo polîmer an olîgomeran ku bi hêsanî ji hêla her membrana ultrafîltrasyonê ve têne rakirin, dihêle ku ava sêvan reng û zelaliya xwe heta şeş hefteyan di 50°C de sabît bihêle. Lakaza *Trichoderma* ya paqijkirî li ser mûyên aluminumê hate bêlivkirin û ji bo rakirina bi awayekî bijartî ya pêkhateyên bêtahm ên ji ber qirêjiya mîkrobî ya ava sêvan çêbûyî hate bikar anîn.¹⁷
Nêzîkî %80-90ê pêkhateyên firar ên ava sêvan ester û aldeîd in, ku bêhnek bêhempa didin ava sêvan.¹⁸Lakaza ji *Trametes versicolor* ji bo zelalkirina ava sêvan li ser piştgiriyek erzan a ji fîbera xwezayî ya qalikên gûzê yên ciwan hatî çêkirin hate sabît kirin.¹⁹Lêkolînên berê li ser stabîlîzekirina ava sêvan (reng û şêlûbûn) bi karanîna rêbazên bê enzîm an bêmobîlîzasyonê, an jî bi tevlihevkirina bi ultrafîltrationê ve lêkolîn kirine.^5,19Lêbelê, bandora lakkazên fungî li ser taybetmendiyên fîzîkî-kîmyewî yên ava sêvê di dema hilanînê de ne diyar e. Ji ber vê yekê, armanca vê lêkolînê ew bû ku bi awayekî ceribandinî guhertinên di taybetmendiyên fîzîkî-kîmyewî, naveroka pêkhateyên fenolîk û çalakiya antîoksîdan a ava sêvê de piştî dermankirinê bi lakkazên fungî û hilanîna du hefteyan di sarincokê de lêkolîn bike. Lakaz xwedî şiyana oksîdekirina pêkhateyên fenolîk in, ku wan ji bo karanîna di pêvajoyên cûrbecûr ên pîşesaziyê de, di nav de zelalkirina ava fêkiyan, sozdar dike. Vê lêkolînê lakkazên ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620 lêkolîn kir, bi balkişandina ser şert û mercên îdeal ji bo çalakî û bandora wan di zelalkirina ava fêkiyan de. Her çend lêkolîna li ser kêzikên îstirîdeyê (P. ostreatus NRC 620) hîn jî sînordar e, lêkolînên berê enzîmên ji çavkaniyên cûda yên fêkiyan, wekî Trametes versicolor û Ganoderma lucidum, lêkolîn kirine. Armanca vê lêkolînê nirxandina sepandina potansiyel a vê enzîmê di pîşesaziya xwarinê de û ronîkirina taybetmendiyên wê yên bêhempa, nemaze pH û germahiya wê ya îdeal bû.
2,2′-Azooxybis(3-etilbenzotiyazolîn-6-asîda sulfonîk) (ABTS) ji Sigma-Aldrich (Kanada) hat kirîn. Hemû reagentên din ên pileya analîtîk bûn.
Navenda Berhevkirina Çanda Mîkroban a Navenda Lêkolînên Neteweyî cureya kivarkên îstirîdeyê ya naskirî NRC620 bi dest xist. Piştî binavçûnê, ev cure li ser şemitokên agarê dekstroza kartol di 4°C de hate hilanîn. Rêbaza amadekirina înokulumê wiha bû: Mîselyûma 10 rojî û bi tevahî pêşkeftî li ser plakayên agarê dekstroza kartol hate înokulkirin û di 28°C de hate înkubasyonkirin. Piştî 10 rojan, sê blokên mîselyûmê yên bi qutra 12 mm bi karanîna qulikek metalî ya sterîl ji navgîna agar hatin derxistin û bi pêvekên pembû yên ku 50 mL navgîna çandina sterîlkirî (pH 5.0, wekî ku berê ji hêla Othman et al. ve hatî vegotin) tê de hatin danîn, di şûşeyên Erlenmeyer ên 250 mL de.²⁰). Kultur 18 rojan di 28°C de hatin înkubasyonkirin. Piştre çand bi kaxiza fîlterê ya Whatman No. 1 hatin parzûnkirin, û supernatantê ku derket holê wekî çavkaniya enzîmê xizmet kir.
Çalakiya lakazê bi karanîna ABTS wekî substrat hate destnîşankirin. Têkelê reaksiyonê (2 mL) 500 μL 0.3 mM ABTS (di tampona sîtrata sodyûmê ya 0.1 M, pH 4.5 de hatiye çareserkirin) û mîqdara pêwîst a nimûneya enzîmê bi ava distilkirî hatiye şilkirin, dihewîne.^21,22Ji ber ku lakaz dikare ABTS di germahiya odeyê de (28 °C ± 2) oksîde bike, oksîdasyona ABTS bi pîvandina zêdebûna vegirtinê li 420 nm (ε₄₂₀= 36,000 cm^-1 M ^-1) bi karanîna spektrofotometreya UV ya Agilent Carry-100. Ji bo oksîdekirina 1 μmol ABTS di hûrdemê de yekîneyeke çalakiya lakazê pêwîst bû. Têkeliya proteînê bi rêbaza Bradford bi karanîna albûmîna seruma ga wekî kontroleke navxweyî hate destnîşankirin.^23,24
Piştî bidestxistina enzîmê ji cureya kivarkên îstirîdeyê NRC 620, çalakiya wê di navberan çandiniyê yên cûda de ji bo 25 rojan di bin şert û mercên statîk de li 28°C hate pîvandin.
Ji bo lêkolîna bandora germahiyê li ser çalakiya lakazê, ceribandin di navbera germahiyê de ji 20 heta 90°C hatin kirin. Berî zêdekirina enzîmê û destpêkirina reaksiyonê, tampon (0.1 M sîtrat sodyûm, pH 4.5) û substrat (ABTS) hatin tevlihevkirin û ji bo 5 deqîqeyan di germahiyên cûda de hatin înkubasyonkirin. Aramiya germî ya enzîmê bi înkubasyonê di tampona fosfata sodyûm 0.05 M (pH 7.0) de li 40, 50, 60, û 70°C ji bo 2 saetan, bi rêzê ve, hate nirxandin. Piştre çalakiya mayî bi karanîna substrata ABTS hate nirxandin.
Bandora pH-ê li ser çalakiya lakazê bi karanîna ABTS-ê wekî substrat di tamponên sîtrat-fosfatê yên 0.1 M de bi rêjeya pH-ê ya 2.5 heta 7.0 hate nirxandin. Çareseriya enzîmê ji bo du saetan di 40°C-ê de di tamponên sîtrat û Tris ên 0.1 M (pH 3, 4, 6, û 7) de hate înkubasyon kirin da ku aramiya pH-ê were nirxandin. Çalakiya mayî bi ABTS-ê wekî substrat piştî înkubasyonê hate hesab kirin.
Lakaz di tampona fosfata sodyûmê (0.05 M, pH 7.0) de ku tê de îyonên metal ên cûrbecûr (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+, û Mn2+) hene, bi rêzê ve di rêjeyên 2.5 mM û 10 mM de ji bo 10 hûrdeman hate înkubasyon kirin. Piştre substrat (ABTS) ji bo destpêkirina reaksiyonê hate zêdekirin, û çalakiya nisbî hate nirxandin.
Oksîdasyona ABTS ji hêla lakazê ve di konsantrasyonên cûda de (0.025–3 mM) di pH 4.5 de hate pîvandin da ku parametreyên kînetîk (Vmax û Km) werin destnîşankirin.^sabîtji hevkêşeya Michaelis-Menten bi karanîna nexşeya Lineweaver-Burk hatin hesabkirin, ku beramberiya rêjeya reaksiyonê wekî fonksiyonek ji dendika substratê nîşan dide. Sabîtên kînetîk ji nexşeya Lineweaver-Burk bi karanîna nermalava GraphPad Prism guhertoya 6.01 hatin hesabkirin.
Piştî ku sêv bi ava çeşme bi tevahî hatin şuştin, ew nîvî kirin û bi makîneya ava sêvan a Braun MP80 a bi temamî otomatîk (li Almanyayê hatiye çêkirin) ava wan hat derxistin. Ava wê bi çar tebeqeyên qumaşê penêr hat parzûnkirin. Tu enzîm li koma kontrolê nehatin zêdekirin, di heman demê de 2.0% lakaz (konsantrasyona herî bibandor a ku hatiye ceribandin) li ava sêvan a nû amadekirî hat zêdekirin, ku dû re du hefteyan di 4°C de hat hilanîn.
Asîdîteya tîtratîbar (TA) û pH li gorî rêbaza Boulton et al. hatin destnîşankirin.^al.27pH-ya her nimûneyê bi karanîna pH-pîvanek dîjîtal (pH-pîvana JENWAY 3510) hate pîvandin. Asîda tîtratîv (TA) li ser bingeha asîda malîk bi karanîna formula jêrîn hate hesabkirin.
Li vir V û C bi rêzê ve qebareya (mL) û konsantrasyona (0.1 mol/L) ya çareseriya hîdroksîda sodyûmê ne ku di tîtrîasyonê de tê bikar anîn. K koefîsyenta veguherîna asîda malîk e, ku wekhevî 0.067 e, û W jî giraniya (g) ava sêvê ye.
Tevahiya madeyên hişk ên çareserker (^TDS) naveroka hemû nimûneyên ava fêkiyan bi karanîna refraktometreyeke berîkê ya PAL-1 (ATAGO, Tokyo, Japonya) hate destnîşankirin. Piştî her pîvandinê, lensa optîkî bi ava bêîyonîze hate şuştin, û her nimûneya ava sêvan sê caran hate ceribandin. Nirxa her nimûneyê bi navînîkirina sê pîvanan hate hesabkirin. Navînî ± devîasyona standard ji bo her nimûneya ava sêvan jî bi navînîkirina van encaman hate hesabkirin.
Vîskoelastîkbûna nimûneyên ava sêvan bi karanîna vîskopîtereke zivirî (RV, Rheotest 2, Almanya) hate nirxandin. Nimûne di nav silindirê "S2" ê vîskopîterê de hate danîn. Vîskosîta xuya bi şemitoka xêza stresa birînê li hember xêza rêjeya birînê hate temsîlkirin, ku ji stresa birînê û xêzên têkildar di rêjeyên birînê yên cûda de (ji 1.00 heta 437.4 s⁻¹) hate hesabkirin. Formula ji bo hesabkirina vîskosîta xuya wiha ye:
Li vir η viskozîteya xuya (cP) ye, τ stresa birînê ye (dyn/cm²), γ rêjeya birînê ye (sec⁻¹), û (τ) bi karanîna nirxên torka (α) û silindirê (Z) bi karanîna formula jêrîn tê hesibandin: τ = Z . α.
Indeksa qehweyîbûnê li gorî rêbaza Meidav ​​​​et al. hate destnîşankirin.^al.29Nimûneyek ava 10 ml bi 2750 xg bo 10 deqeyan hate santrifujkirin. 5 ml ji supernatantê ava fêkiyan bi 5 ml etanolê %95 re hate tevlihevkirin. Vegirtinîya tevliheviyê li 420 nm bi karanîna spektrofotometreya Shimadzu UV (UV-1601 PC) hate pîvandin.
Naveroka tevahî ya fenolîk (TPC) bi awayekî kolorimetrîk bi karanîna reaktîfa Folin-Ciocalteu wekî ku ji hêla Boulton et al. ve hatî vegotin hate destnîşankirin.^[27]]. Xêzeke standard a asîda galîk ji bo konsantrasyonên ji 0 heta 500 mg/L hate çêkirin (^r²= 0.997). Encam wekî hevsengên asîda galîk (mg GAE/mL) têne îfade kirin.
125 μL ava distilkirî û 2850 μL çareseriya FRAP li 25 μL ava sêvê zêde bikin û tevlihevê di tariyê de bihêlin.³⁰deqe. Piştre bi karanîna spektrofotometreyek Shimadzu UV (UV-1601 PC) vegirtinê li 593 nm bipîvin. Reaktîfa FRAP bi tevlihevkirina tampona asetatê ya 300 mM (pH 3.6), klorîda hesin(III) ya 20 mM, û 10 mM 2,4,6-tris(2-pîrîdîl)trîazîn (TPTZ) (di 40 mM HCl de çareser bûye) bi rêjeya 10:1:1 hate amadekirin. Xêzek standard bi karanîna Trolox wekî standard hate çêkirin (^R²= 0.999), û encam wekî μM Trolox/mL têne diyar kirin.
Çalakiya antîoksîdan a ava fêkiyan a dermankirî û nehatî dermankirin bi karanîna rêbaza DPPH hate destnîşankirin da ku şiyana wan a paqijkirina radîkalên azad ên DPPH were nirxandin.³¹Deh mîkrolître ava fêkiyan bi 1 ml çareseriya DPPH (100 μM) di metanolê de hatin tevlihevkirin. Piştî reaksiyonê di tariyê de ji bo 30 hûrdeman, vegirtina tevliheviyê li 517 nm bi karanîna spektrofotometreyek Shimadzu UV (UV-1601 PC) hate pîvandin. Encam wekî hevsengên trolox (μM trolox/ml) li gorî xêzek kalibrkirinê hatin îfadekirin (_^R2= 0.990).
Daneyên ku hatine bidestxistin nîşan dan ku hilberîna herî zêde ya lakazê di kivarkên îstirîdeyê yên NRC 620 de heta dawiya roja 18-an a fermentasyonê hatiye dîtin, û gihîştiye çalakiyek 1302 U/L. Ev wekî bingehek ji bo destnîşankirina dema çandiniyê ya çêtirîn ji bo hilberîna lakazê xizmet kir (Wêne 1). Her çend hilberîna enzîmê bi zêdebûna dema çandiniyê re zêde bû jî, rêjeya zêdebûnê rasterast bi dema çandiniyê re ne rêjeyî bû; piştî 21 rojan, çalakiya enzîmê tenê bi 90 U/L zêde bû (gihand 1390 U/L). Ji ber vê yekê, di dawiyê de 18 roj wekî dema çandiniyê ya çêtirîn hat hilbijartin da ku berhema hilberê bi feydeyên aborî yên zêdebûna dema çandiniyê re hevseng bike.
Bandora dema çandiniyê li ser berhema lakazê di Pleurotus ostreatus NRC 620 de. Sê blokên mîselî yên fungî (12 mm) di nav 50 ml navgîniya sterîl de hatin çandin û dûv re di 28 °C de ji bo demên cûda hatin çandin.
Li gorî lêkolînên din, encamên me nîşan didin ku dema çandiniyê ya îdeal ji bo bidestxistina lûtkeya veşartina lakazê ji hêla fungî ve muhtemelen di navbera 7 û 36 rojan de ye.³²Li gorî Ezike û hevkarên wî.³³*Trametes polyzona* WRF03 heta dawiya roja nehan a fermentasyonê, bi çalakiyek taybetî ya 1637 U/mg proteîn, herî zêde lakkas hilberand. Wekî din, Othman et al.³⁴dît ku *Trichoderma harzianum* S7113 di roja pêncemîn a çandiniyê de mîqdarek mezin ji lakazê derxistiye. Rêjeya hilberîna lakazê di roja çardehê de gihîştiye asta herî bilind û dû re hêdî hêdî kêm bûye.³⁴Her çend veşartina enzîmê dikare di qonaxa sereke ya mezinbûnê de jî çêbibe, ew bi gelemperî di qonaxa navîn de digihîje lûtkeyê û bi xerckirina çavkaniyek karbon an nîtrojenê ve tê destpêkirin.^34,35
Her çend lakkaza ji Pleurotus ostreatus NRC 620 di navbera germahiyên 50°C û 80°C de çalakiyeke bilind nîşan da, nêzîkî çalakiya herî zêde (69-98%) bû, çalakiya wê ya herî zêde di 70°C de hate dîtin (Wêne 2a). Li derveyî vê rêza germahiyê, çalakiya enzîmê di nêzîkî 70°C de kêm bû. Ev encam nîşan didin ku enzîm di germahiyên bilind de çalak e, dibe ku ji ber ku germahiya bilind enerjiya kînetîk a reaksiyonê zêde dike.
Bandora germahiya reaksiyonê (a) û pH (b) li ser çalakiya lakazê di *Pleurotus ostreatus* NRC 620 de. Germahîyên di navbera 20 û 90 °C de bi pêş-înkubasyonê tevlihevê di germahiyên cûda de ji bo 5 hûrdeman berî lêzêdekirina enzîmê û destpêkirina reaksiyonê hatin bidestxistin. Bandora pH-ê li ser çalakiya lakazê bi karanîna ABTS wekî substrat di çareseriyên ku tampona sîtrat-fosfatê ya 0.1 M dihewîne de li ser rêza pH-ê ya 2.5 heta 7.0 hate nirxandin.
Li gorî Ezike û^al.33, germahiya çêtirîn ji bo laccase *Trametes polyzona* WRF03 55°C ye, ku wekî ya *Ganoderma lucidum* e.^laccase36û dişibihe germahiya çêtirîn (50 °C) ji bo *Trametes polyzona* KU-RNW02737^lakaz . ^Baldrian38destnîşan dike ku, wekî sîstemên din ên enzîmên hilweşîner ên lîgnînê, rêjeya germahiya îdeal ji bo lakazê di navbera 50 û 70°C de ye.
Encam nîşan dan ku enzîm di pH 3.0 de çalakiya herî bilind nîşan da, di pH 3.5 de gihîşt 94% çalakiyê. Lêbelê, ew di nav rêzek pH-ê ya fireh de ji 2.5 heta 7.0 çalak ma (Wêne 2b). Wekî din, wê di şert û mercên asîdî de li gorî şert û mercên bêalî an alkalîn çalakiyek bilindtir nîşan da. Çalakiya wê di nav rêza pH-ê de ji 2.5 heta 4.5 bi kêmî ve 77% ma, lê di pH 7.0 de tenê gihîşt nêzîkî 38%. pH-ya çêtirîn ji bo lakazê ji *Trametes polyzona* WRF03 4.533 bû, ku heman pH-ya lakazê ji *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40, û *Trametes hirsuta* 41 e. Lêbelê, li gorî lêkolîna Chairin et al.⁴², pH-ya çêtirîn ji bo lakazê ji *Polymorpha f. sp.* WR710-1 2.2 e, lê pH-ya çêtirîn ji bo lakazê ji *Polymorpha f. sp.* IBL-04 5.043 e. Girêdana anyonên hîdroksîd (astengkerê lakazê) bi atomên sifir ên lakazê T2/T3 dibe ku sedema kêmbûna çalakiya lakazê di bin şert û mercên pH-ya bêalî an alkalîn de be. Ev dikare veguhestina elektrona navxweyî ji navenda T1 ber bi navenda T2/T3 asteng bike, bi vî rengî^{sînordarkirin}çalakiya enzîmê 23,44
Bi înkubasyona enzîmê di germahiyên cuda de, hat dîtin ku hem dema înkubasyonê û hem jî germahî bandor li ser aramiya enzîmê dikin. Bi taybetî, lakaza ji *Trametes polyzona* NRC 620 di 40℃ û 50℃ de aramiyeke bilindtir nîşan da, piştî 120 hûrdeman bi rêzê ve %68.33 û %59.61 ji çalakiya xwe ya destpêkê parast (Wêne 3a). Berevajî vê, di heman şert û mercan de (40℃ û 50℃, 120 hûrdem), lakaza ji *Trametes polyzona* WRF03 bi rêzê ve %64.38 û %42.92 ji çalakiya xwe parast.³³Berevajî vê, zêdebûna dema înkubasyonê û germahiyê aramiya lakaza *Trametes polyzona* NRC 620 kêm kir; Piştî înkubasyonê li 60℃ û 70℃ ji bo 60 hûrdeman, çalakiya wê bi rêzê ve daket 39.24% û 1.72% (Wêne 3a). Li gorî encamên ceribandinê, lakaza ji *Trametes polyzona* WRF03 di tevahiya pêvajoya dermankirina germî de li 40 û 50℃ aramiya bilindtir nîşan da.³³Bi heman awayî, Lueangjaroenkit û hwd.^al.37û Chairin û^al.42aramiya lakazan ji Trametes polyzona KURNW027 û Trametes polyzona WR710-1 li 50°C bo 1 saetê, bi rêzê ve, ragihand. Wekî biyokatalîzatorek bikêrhatî ku di warên cûrbecûr ên biyoteknolojiyê de tê sepandin, divê lakaz di rêzek germahiyê ya fireh de aramî û performansek baş hebe.
Aramiya termostatîk (a) û aramiya pH (b) ya lakazê ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620. Aramiya termostatîk bi înkubasyona çareseriya enzîmê di tampona sodyûm fosfatê ya 0.05 M (pH 7.0) de li 40, 50, 60, û 70 °C bo 2 saetan, bi rêzê ve, hate nirxandin. Aramiya pH bi înkubasyona çareseriya enzîmê di tampona sîtratê ya 0.1 M û tampona Tris (pH 3, 4, 6, û 7) de li 40 °C bo 2 saetan hate nirxandin. Çalakiya mayî bi karanîna ABTS wekî substratek piştî înkubasyonê hate hesab kirin.
Ji bo diyarkirina şert û mercên çêtirîn ji bo karanîn û hilanîna enzîmê, me bandora pH-ê li ser aramiya lakazê lêkolîn kir. Têkiliya bi nirxên pH-ê yên cûda re bandorek girîng li ser aramiya avahiya proteînê kir, bi vî rengî bandor li aramî û çalakiya molekula enzîmê kir. Encam nîşan dan ku enzîm di bin şert û mercên asîdî de kêmtir aram bû, lê di nirxên pH-ê yên bilindtir (herêmên bêalî û alkalîn) aramiya çêtir nîşan da. Di nirxên pH-ê yên 7.0, 6.0, 4.0 û 3.0 de, rêjeyên ragirtina enzîmê piştî 120 hûrdeman bi rêzê ve bi qasî 100%, 62.54%, 52.39% û 11.14% bûn (Wêne 3b). *Strombus multisus* WRF03 lakaz di nirxên pH-ê yên bêalî (5.5–6.5) û aramiya kêmtir di nirxên pH-ê yên asîdî (di bin 4.0 de) nîşan da. Piştî 120 hûrdeman li nirxên pH-ê yên 5.5, 6.0, û 6.5, rêjeyên ragirtina enzîmê bi rêzê ve bi qasî 82%, 100%, û 93% bûn.³³Khairin et al.⁴²destnîşan kir ku lakaza ji Trametes polyzona WR710-1 di navbera pH-a 6.0 û 7.0 de sabît bû, di heman demê de Sayed û hevkarên wî...⁴⁵nîşan da ku lakaz di bin şert û mercên pH-ya bêalî de aramtir bû. Lêbelê, lakaza ji Cerrena unicolor di bin şert û mercên alkalîn de jî aramî nîşan da (pH 9.0).⁴⁶Lakazên ku hatine lêkolînkirin li ser rêzek pH-ê ya fireh aramiya bilind nîşan dan. Ev dibe ku taybetmendiyek girîng be ji bo sepanên pîşesaziyê.
Ji ber ku hin îyonên metalî bandorên hem teşwîqker û hem jî astengker li ser çalakiya enzîman hene, divê bandorên wan li ser çalakiya enzîman di sepanên pîşesaziyê de werin hesibandin. Ev pir girîng e ji ber ku îyonên metalî gemarên hawîrdorê yên hevpar in ku dikarin bandorê li ser aramiya û senteza enzîmên derveyî hucreyê bikin.⁴⁷Ji bo lêkolîna bandorên gelek îyonên metalî li ser lakazê ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620, me ceribandinên têkildar pêk anîn. Wekî ku di Wêne 4 de tê xuyang kirin, li gorî celebê metalê ku tê bikar anîn, zêdekirina rêjeya îyonên metalî ji 2.5 mM heta 10 mM bandorek neyînî li ser fonksiyona enzîmê kir. Bo nimûne,^Mg²⁺ , ^Co²⁺ , ^Zn²⁺, û^Cu²⁺dikare çalakiya enzîmê teşwîq bike û çalak bike, di heman demê de^Na⁺ , ^Mn²⁺ , ^Ca²⁺, û^K⁺dikarin çalakiya enzîmê asteng bikin. Di rêjeya 10 mM de, îyonên Cu²⁺ û Mg²⁺ çalakkerên herî bihêz ên çalakiya lakazê ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620 bûn, û pileya çalakkirinê bi rêzê ve bi qasî %34 û %20 peyda kirin. Lêbelê, di rêjeya 10 mM de, îyonên Ca²⁺ astengkerên herî bihêz ên lakazê bûn, û çalakiya enzîmê bi qasî %60 kêm kirin.
Bandora îyonên metalî li ser çalakiya lakaza Pleurotus ostreatus NRC 620. Lakaz 10 deqîqeyan di nav tampona fosfata sodyûmê (0.05 M, pH 7.0) de ku îyonên metalî yên cûrbecûr di konsantrasyonên 2.5 mM û 10 mM de dihewîne, hate înkubasyonkirin. Piştre reaksiyon bi lêzêdekirina substratê (ABTS) hate destpêkirin, piştî ku çalakiya nisbî hate pîvandin.
Encamên me bi yên nivîskarên din re li hev tên ku dîtine ku Mg²⁺ û Cu²⁺ çalakiya *Trametes polyzona* WRF03³ zêde dikin. Castaño et al.⁴⁸ dîtin ku lakaza ji *Xylaria* sp. heta radeyekê ji hêla îyonên sifir (Cu²⁺) ve tê teşwîqkirin. Wekî din, Foroutanfar et al.⁴⁹ û Si et al.⁵⁰ lêkolînên wekhev li ser lakazan ji *Paraconiothyrium variabile* û *Trametes pubescens*, bi rêzê ve, kirin. Cihê girêdana sifir a tîpa II (T2) ya vê enzîmê dikare bi Cu²⁺ di rêjeyek diyarkirî de were têrkirin, ku dibe ku teşwîqkirina çalakiya lakazê di rêjeyên bilindtir ên Cu²⁺⁳⁹ de rave bike. Ji ber ku lakkazên fungên rotîna spî oksîdaz in ku gelek atomên sifir dihewînin, bandorên îyonên sifir li ser çalakiya lakkazê cûrbecûr in û ji teşwîqker û astengker bigire heya bêalî diguherin.⁵¹ Berevajî vê, Zhou et al.^[52]ragihand ku^Cu²⁺çalakiya lakazê ya termîtên bin erdê yên Taywanê (Odontotermes formosanus) asteng kir. Lêbelê, lakazên Cerena sp. HYB07^[53]û Clitocybe maxima^[54]ji hêla iyonên sifir ve nehatin bandorkirin.
Taybetmendiya substratê bi parametreyên wê yên kînetîk (Km û Vmax) hate temsîlkirin; her ku girêdana substratê bi enzîmê re xurttir be, nirxa Km kêmtir dibe û taybetmendiya substratê jî bilindtir dibe.^3,21,55Parametreyên kînetîk (Km û Vmax) yên lakazê ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620 bi karanîna nermalava GraphPad Prism 6.0 bi xêzkirina nexşeya Lineweaver-Burk (Wêne 5) hatin destnîşankirin. Dema ku ABTS wekî substratek hat bikar anîn, encam 1.99 mM û 16217 μmol bûn.^{deqe⁻¹ L⁻¹,}bi rêzdarî. Elsayed û yên din.²¹ragihand ku nirxên Km ji bo oksîdasyona ABTS bi rêzê ve 0.1 mM û 0.064 mM bûn, ku ev yek nîşan dide ku îzoenzîmên Lac A û Lac B ji bo ABTS xwedî girêdanek bilind in. Wekî din, nirxên Vmax 0.182 μmol bûn.^deqe⁻¹û 0.603 μmol^deqe⁻¹, bi rêzê ve. Nirxa Km ya bidestxistî ji ya Trametes polyzona WRF03 (8.66 mM) kêmtir bû; ji bilî vê, nirxa wan a Vmax (1429 mmol min⁻¹) jî bû.^kêmkirindema ku ABTS wekî substratek tê bikar anîn.33 Bi heman awayî, nirxên Km yên konsantrasyonên laccase yên Lentinus squarrosulus MR13 û Trametes sp. AH28-2 bi rêzê ve 0.0714 mM û 0.025 mM bûn, û nirxên Vmax 0.0091 mM min−1 û 0.67 mM min−1 mg−1 bûn (li gorî ABTS)^{, bi rêzê ve.56,57}
Bandora rêjeya ABTS li ser çalakiya lakazê ji *Pleurotus ostreatus* NRC 620 hate lêkolînkirin, û nexşeya Lineweaver-Burk a beramberiya leza reaksiyonê ya destpêkê li hember rêjeya ABTS hate xêzkirin. Reaksiyona oksîdasyonê ya ABTS bi giraniyên cûda (0.025–3.0 mM) ya lakazê di pH 4.5 de hate pîvandin da ku parametreyên kînetîk (Vmax û Km) werin destnîşankirin. Sabîtên kînetîk ên Michaelis-Menten bi karanîna nexşeya Lineweaver-Burk a beramberiya leza reaksiyonê li hember rêjeya substratê hatin hesabkirin. Sabîtên kînetîk ji nexşeya Lineweaver-Burk bi karanîna nermalava GraphPad Prism 6.01 hatin hesabkirin.
Enzîmên zelalkirinê yên kevneşopî, wek pektînaz, madeyên pektîk hîdrolîz dikin, vîskozîtî û tîrêjiyê kêm dikin. Ew bi bandor polîsakarîdên avahîsaziyê hilweşînin û pir caran bi enzîmên din re, wek selulaz û hemîselulaz, têne bikar anîn da ku berhem û şefafiyê baştir bikin. Lêbelê, pektînaz bi taybetî pêkhateyên fenolîk hedef nagirin, ku beşdarên sereke yên tîrêjiyê û qehweyîbûna oksîdatîf in, nemaze di ava fêkiyan de wek ava sêv û tirî.⁵⁸Berevajî vê, lakkas oksîdasyona pêkhateyên fenolîk katalîze dikin, wan polîmerîze dikin û dibin molekulên mezintir û neçareserbar ku dikarin bi rûniştin an fîlterkirinê werin rakirin. Ev mekanîzma ne tenê zelaliyê baştir dike, lê di heman demê de temenê rafê yê ava fêkiyan dirêj dike bi kêmkirina îhtîmala qehweyîbûna oksîdatîf a ji ber pêkhateyên fenolîk çêdibe. Wekî din, pêvajoyên zelalkirina li ser bingeha lakkasê dikarin di bin şert û mercên pêvajoyê yên nerm de (pH 3.5–5.5, germahî 25–40 °C) werin kirin, ku wan ji bo ava fêkiyan a nazik guncan dike bêyî ku taybetmendiyên wan ên xurek an organoleptîk xirab bibin.⁵⁹Lêkolînan nîşan dane ku dermankirina bi pektinazê dikare ava fêkiyan di 1-2 demjimêran de zelal bike, lê dermankirina lakazê bi gelemperî ji bo kêmkirina tevahî ya pêkhateyên fenolîk demek reaksiyonê ya dirêjtir (3-6 demjimêran) hewce dike. Lêbelê, ev pêvajo dikare bi bêmobîlkirina enzîmê an jî bi hevberkirina lakazê bi rêbazên zelalkirina mekanîkî ve were çêtir kirin.⁶⁰Di vê lêkolînê de, profîla enzîmê ya ekstrakta xav çalakiyên girîng ên lakaz û α-amîlazê nîşan da, di heman demê de çalakiyên pektînaz û ksîlanaz pir kêm bûn, û çalakiya selulazê nehat tespîtkirin. Ji ber vê yekê, kêmbûna tîrêjiyê û naveroka fenolîk bi giranî ji ber çalakiya lakazê bû, di heman demê de guherîna vîskozîteyê dikare qismî ji ber çalakiya amîlazê be.
Tabloya 1 parametreyên fîzîkî-kîmyewî yên ava sêvê ya teze hatiye kişandin û nimûneyên bi lakazê hatine dermankirin nîşan dide. Encam nîşan dan ku rêjeya ava sêvê ya teze hatiye kişandin (%71.59) ji rêjeya nimûneyên bi lakazê hatine dermankirin (%87.34) kêmtir bû. Ev encam bi dîtinên Pilnik û Orange re li hev tên.⁶¹, ku destnîşan kir ku karanîna enzîman di hilberandina fêkiyan de dikare hilberîna ava fêkiyan zêde bike, fîltrekirinê baştir bike, û ji bo konsantrasyonê ava zelal û bi kalîte bilind bi dest bixe. Zêdebûna hilberîna ava fêkiyan bi giranî ji ber zêdebûna naveroka şekirên çareserker di ava fêkiyan de ye. Di dema hîdrolîza enzîmatîk a fêkiyan de, mezoglea û pektîn di dîwarên şaneyên hilberê de têne hilweşandin û vediguherin madeyên çareserker ên wekî şekir û asîdên bêalî.^62.Nirxa pH-ê ya ava sêvê ya bi enzîmê hatî dermankirin ji ya koma kontrolê pir kêmtir bû (P < 0.05), û nirxa pH-ê ya her du koman di dema hilanînê de pir zêde bû (Tabloya 1). Ev encam bi yên Mark et al. re li hev in.⁶³, ku destnîşan kir ku pH-ya ava fêkiyên gûzê piştî hilanînê piştî dermankirina germê kêm dibe. Hilweşîna pektîn û çêbûna asîda galakturonik piştî dermankirina enzîman dibe ku berpirsiyarê zêdebûna pH-ê di dema hilanînê de be. pH-ya nimûneyên ku bi enzîmê hatine dermankirin di navbera 4.05 û 4.31 de di seranserê hilanînê de ma, lê pH-ya ava sêvê ya nehatî dermankirin di navbera 4.12 û 4.33 de diguhere.
Asîdîta giştî (TA) ya hem nimûneyên nehatine dermankirin û hem jî yên ku bi lakazê hatine dermankirin bi zêdebûna dema hilanînê re meyleke kêmbûnê nîşan da (Tabloya 1). Kêmbûna asîdîteyê bi veguherîna asîdên organîk bo karbohîdratan an reaksiyonên enzîmatîk, û her weha oksîdasyonê di dema hilanîna ava fêkiyan de ve girêdayî bû.⁶⁴Asîdîta giştî ya ava sêvê ya kontrolê û nimûneyên bi enzîmê hatine dermankirin ji ya ava fêkiyên din (ava fêkiyê strawberî %0.9, ava gûzê %2.2, ava kumquatê %1.0, ava qeysiyê %2.4, ava porteqalê %0.8) kêmtir bû, lê dişibiya ya ava fêkiyên din (mînak, ava hirmî %0.3).⁶²Ev cudahîyên di ava sêvan a teze ya nehatî dermankirin de, dibe ku ji ber faktorên cûrbecûr bin, wek şert û mercên mezinbûnê, faktorên genetîkî, asta gihîştinê û rêbazên hilberandinê.⁶⁵Kêmbûna asîdîteya giştî ya ava sêvê ya kontrolê û ya bi lakazê hatî dermankirin bi encamên ku ji hêla Singh et al. ve hatine pêşkêş kirin re lihevhatî ye.⁶⁶derbarê kêmbûna asîdîteya giştî ya ava sêvê ya Jin Nuo piştî 74 rojan hilanînê de. Ji aliyekî din ve, Oshmiansky û Wojdylo⁶⁷dema ku bandora rêbazên zelalkirina kevneşopî lêkolîn kirin, di asîdîteya ava sêvan de ti guhertinên girîng nedîtin.
Encamên ku di Tabloya 1-ê de hatine pêşkêş kirin nîşan didin ku nirxa tevahî ya madeyên çareserker (TSS) a ava sêvê ya bi lakazê hatî dermankirin ji ya nimûneya nehatî dermankirin bilindtir bû. Ev encam bi lêkolînên weşandî re li hev dikin.⁶⁸Herwiha, Tabloya 1 nîşan dide ku nirxa TSS ya koma kontrolê ya ava sêvê di xala destpêkê de 9.58 bû û di dawiya dema hilanînê de gihîşt 11.05. Ev nirx ji nirxên TSS yên ava sêvê ya teze ku ji hêla Hamid et al. ve hatine ragihandin kêmtir in.⁶⁹(bi rêzê ve 11.2 û 11.80). Nirxa TSS ya nimûneyên ava sêvê yên bi lakazê hatine dermankirin bi girîngî zêde bû, ji 11.23 dest pê kir û piştî du hefteyan hilanînê li 4°C gihîşt 12.93 (Tabloya 1). Zêdebûnek wisa ya TSS di dema hilanînê de di fêkiyên citrus, lîmon û porteqalên şîrîn de jî hate dîtin. Zêdebûna tevahî madeyên çareserker (TSS) di dema hilanînê de dibe ku ji ber hîdrolîza polîsakarîdan (nîşasta) bo monosakarîdan (şekir), zêdebûna konsantrasyonê ji ber bêavbûna ava fêkiyan, û hilweşandina pektîn di ava fêkiyan de bo madeyên çareserker be. Zêdebûna tevahî madeyên çareserker (TSS) bi îhtîmalek mezin ji ber zêdebûna şekirên çareserker be, ku dibe ku bi veguherîna pektîn an selulozê bo şekirên çareserker ji hêla pektîn an selulazê ve, bi rêzê ve, an jî bi hîdrolîza nîşastayê bo şekiran çêbibe, wekî ku ji hêla Hamed et al. ve hatî ragihandin.^69.Bandora lakazê li ser taybetmendiyên ava sêvan dikare bi dîtbarî were dîtin, ji ber ku ava sêvan a bi lakazê hatî dermankirin herikîn û vîskozîteya wê kêmtir e ji ava bê dermankirin. Ev çavdêrî di Tabloya 1-ê de hatî tomar kirin; Vîskozîteya nimûneya bi enzîmê hatî dermankirin 1.87 cP bû, lê vîskozîteya nimûneya kontrolê 2.95 cP bû. Ev kêmbûna girîng a vîskozîteyê muhtemelen ji ber kapasîteya ragirtina avê ya bilindtir a madeyên mîna pektîn û avakirina avahiyek toreke hevgirtî ye.
Di vê lêkolînê de, bandora lakazê li ser îndeksa qehweyîbûnê (BI) ya ava sêvan bi pîvandina vegirtinê li 420 nm bi karanîna spektrofotometreyekê hate lêkolînkirin. Encam di Tabloya 1-ê de têne nîşandan. Di dema hilanînê de, BI ya nimûneyên ava sêvan di her du komên dermankirî û bê dermankirin de meyleke zêdebûnê ya gav bi gav nîşan da. BI pileya qehweyîbûnê nîşan dide û dikare wekî xizmet bike.^girîngnîşana reaksiyonên qehweyîbûna enzîmatîk û ne-enzîmatîk. Di dema hilanînê de vegirtinê bi girîngî zêde bû (P < 0.05). Di dawiya hilanînê de,_A420Nirxa nimûneyên ava sêvan di komên kontrol û komên ku bi enzîmê hatine dermankirin de bi rêzê ve bi qasî %217 û %121 zêde bû (Tabloya 1). Encam nîşan didin ku dermankirina enzîmê dikare bi bandor rêjeya qehweyîbûnê bi qasî %56 kêm bike. Encamên Bezerra et al.^[19]] bi encamên me re li hev dikin; Wan ji bo zelalkirina ava sêvê fîbera laccase-glutaraldehyde-hûzê bikar anîn, rengê wê yê orîjînal bi rêjeya %61 kêm kirin.
Her çend polîfenolên di ava fêkiyan de bandorên xurekî û dermanî yên erênî li ser laşê mirov dikin jî, ew dikarin bi proteînan re jî reaksiyonê nîşan bidin, bibin sedema ewrbûna ava fêkiyan, rûniştin, an jî tîrêjbûnê, bi vî rengî tama û bîhna berhemê diguherînin û temenê wê yê rafê kêm dikin.⁷¹Armanca vê lêkolînê ew bû ku bi karanîna lakazê ji Pleurotus ostreatus NRC 620, rêjeya pêkhateyên fenolîk ên ava sêvan bi ewlehî kêm bike. Encamên ku di Tabloya 1-ê de hatine pêşkêş kirin nîşan didin ku rêjeya tevahî ya pêkhateyên fenolîk ên ava sêvan a bi lakazê hatî dermankirin berî hilanînê di 4°C de bi girîngî kêm bûye. Wekî din, rêjeya tevahî ya pêkhateyên fenolîk di her du nimûneyên lêkolînkirî de di dema hilanînê de jî kêm bûye (Tabloya 1). Lêkolîna Sandri et al.⁷²nîşan da ku ava sêvê ya bi enzîmê hatiye dermankirin dikare çalakiya xwe ya antîoksîdan û naveroka pêkhateyên fenolîk biparêze. Lêbelê, encamên lêkolînek ji hêla Lettera et al.⁷³nîşan didin ku dermankirina ava porteqalê bi lakaza fungî dikare naveroka pêkhateyên fenolîk di nav wê de heta %45 kêm bike.
Têkelên fenolîk xwedî taybetmendiyên wekî paqijkirina radîkalên azad, kêmkirin û vemirandina oksîjena singlet, veguhastina atoma hîdrojenê, û bexşandina elektronan bo radîkalên azad in, ku wan dike antîoksîdanên bihêz.⁷⁴Ji ber vê yekê, di vê lêkolînê de, rêbazên DPPH û FRAP-ê hatin bikar anîn da ku bandora lakazê li ser çalakiya antîoksîdan a ava sêvê ya ku 14 rojan di sarincokê de hatiye hilanîn were nirxandin (Tabloya 2). Her du rêbazan jî di dema hilanînê de zêdebûna çalakiya antîoksîdan nîşan dan, ku dibe ku ji ber zêdebûna pêkhateyên fenolîk ên azad an jî çêbûna berhemên reaksiyona Maillard (MRP) be, û berhemên reaksiyona Maillard bi îhtîmaleke mezin sedema zêdebûna çalakiya antîoksîdan in.⁷⁵Reaksiyonên qehweyîbûna ne-enzîmatîk (di nav de hilweşîna asîda askorbîk, reaksiyonên Maillard, û hilweşîna şekirên bi katalîzasyona asîdê) rengdêrên qehweyî (melanoîdîn) çêdikin. Berhemên hilweşîna asîda askorbîk ên navîn û berhemên hilweşîna şekir (wek pêkhateyên karbonîl) dikarin bi rêya reaksiyonên Maillard bi asîdên amînî re reaksiyonê bikin.⁷⁶Her çend qehweyîbûna fêkî û sebzeyan di dema hilanînê de bi berfirehî hatibe lêkolîn kirin jî, têgihîştina me ya van reaksiyonan hîn jî bi sînor e.⁷⁷Li gorî rêbaza FRAP, ava sêvê ya bi lakazê hatiye dermankirin bi rêbaza DPPH çalakiya antîoksîdan a pir kêmtir nîşan da (Tabloya 2), û çalakiya antîoksîdan a hemî nimûneyan bi zêdebûna dema hilanînê re pir zêde bû. Di vê lêkolînê de du rêbazên cûda ji bo destnîşankirina çalakiya antîoksîdan hatin bikar anîn ji ber ku prensîbên wan ji hev cuda ne. Rêbaza DPPH şiyana bêbandorkirina radîkalên azad dipîve, lê rêbaza FRAP şiyana kêmkirina îyonên hesin dipîve. Ji ber vê yekê, tê pêşniyar kirin ku ji bo destnîşankirina çalakiya antîoksîdan gelek rêbaz werin bikar anîn da ku çalakiya antîoksîdan a nimûneyên lêkolînkirî çêtir were fêm kirin.⁷⁸
Yek ji encamên sereke yên vê lêkolînê ew e ku lakaza *Pleurotus ostreatus* NRC 620 di 70°C û pH 3.0 de çalakiya çêtirîn nîşan dide. Li gorî lakazên din ên fungî yên ku bi gelemperî ji bo zelalkirina ava fêkiyan têne bikar anîn, wek lakazên *Trametes versicolor* û *Ganoderma lucidum*, *P. ostreatus* NRC 620 aramiya germî ya bilindtir û pH-ya asîdîtir nîşan dide. Lakazên ji *Trametes versicolor* û *Ganoderma lucidum* bi gelemperî di navbera 50-60°C û di nirxên pH-ê yên di navbera 3.5 û 5.0 de çalakiya çêtirîn nîşan didin. Ev cûdahî dikare bibe sedema baştirkirina karîgeriya zelalkirina ava fêkiyan, nemaze ji bo ava asîdî ku aramiya li nirxên pH-ê yên nizm girîng e. Taybetmendiya bêhempa ya *P. Li gorî lakazên din ên fungî yên lêkolînkirî, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 şiyana xebitandina bi bandor di bin şert û mercên dijwartir de nîşan dide. Germahiya çalakiya wê ya bilindtir û çêtirîn, avantajên potansiyel di sepanên pîşesaziyê de nîşan dide, wekî rêjeyên reaksiyonê yên bileztir û kêmbûna qirêjiya mîkrobî. pH-ya wê ya nizm, ku bi xwezaya asîdî ya gelek ava fêkiyan re pir guncaw e, dibe ku di pêvajoyên zelalkirina ava fêkiyan de bikêr be. Ev encam lêkolînek bêtir ji bo sepandina di pîvanek mezin de heq dikin, û *Pleurotus ostreatus* NRC 620 dike alternatîfek guncaw ji bo çavkaniyên lakaza fungî yên kevneşopî. Li gorî lêkolînên berê, me dît ku germahiya çêtirîn 60°C û pH-ya çêtirîn 3.0 e. Piştî reaksiyonê li 60°C ji bo 80 hûrdeman, lakaza *Ganoderma lucidum* parast.⁴⁶% ji çalakiya wê.79 Li gorî Kurniawati û Nicelle⁸⁰Enzîmên *Ganoderma lucidum* di 25°C û nirxên pH-ê yên di navbera 5.0 û 8.0 de, û di pH 6.0 û germahiyên di navbera 10 û 30°C de, aramiya xwe ji ya pir baş heta navîn nîşan didin. Di vê lêkolînê de, me dît ku pH û germahiya çêtirîn ji bo çalakiya enzîmê ji bo *Pleurotus ostreatus* bi rêzê ve 3.0 û 70°C bûn. Piştî înkubasyonê li 40°C û 50°C ji bo du saetan, enzîm bi rêzê ve 68.33% û 59.61% ji çalakiya xwe parast. Wekî din, Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase çalakiyek bilind li ser rêzek germahiyê ya fireh ji 50°C heta 80°C nîşan da, hema hema gihîşt çalakiya herî zêde (69%–98%), bi çalakiya herî zêde di 70°C de hate dîtin.
Di encamê de, lakaza kivarka îstirîdeyê NRC620, ku di bin şert û mercên statîk de hatiye bidestxistin, li seranserê rêzek şert û mercên pH û germahiyê çalakî û aramiya çêtirîn nîşan da, û li gorî çavkaniyên din ên enzîman aramiya bilindtir nîşan da. Zêdekirina 10 mM MgSO₄ û CuSO₄ çalakiya enzîmê bi rêzê ve bi qasî %21 û %35 zêde kir. Dema ku enzîm bû ava sêvê, pH û vîskozîtî kêm kir, di heman demê de naveroka fenolîk di dema hilanînê de tenê hinekî kêm bû.
Encam potansiyela lakazê di pîşesaziya xwarinê de, bi taybetî di zelalkirina vexwarinan de, piştrast dikin. Bi şikandina taybetî ya pêkhateyên fenolîk, lakaz ne tenê tîrêjiyê kêm dike û zelaliyê baştir dike, lê di heman demê de kalîteya ava fêkiyan di bin şert û mercên xebitandinê yên nerm de jî diparêze. Berevajî ajanên zelalkirina kevneşopî yên wekî jelatîn, bentonît û jela silîka, lakaz bermayiyan çênake û bîhnên xweş ji vexwarinan dernaxe, ev yek wê dike vebijarkek hawirdorparêztir û domdartir. Wekî din, li gorî enzîm û rêbazên din ên parzûnkirinê, lakaz çareseriyek armanckirî û lêçûn-bandor pêşkêş dike bêyî ku kalîteya hilberê xirab bike.
Kyomuhimbo, HD û Brink, HG. Bikaranîn û stratejiyên bêmobîlkirinê yên lakazên ku sifir tê de hene; nirxandinek. Helîyon 9, e13156 (2023).